Россия

lab@ noykem.ru

Москва: (499) 346-39-14,  (495) 77-46-319   Новосибирск: (383) 363-85-90 (многоканальный)

Наша задача - обеспечивать Ваши лаборатории качественной продукцией

 

Автор: 
Войтова Ксения Васильевна (научный сотрудник)
Организация: 
Государственное научное учреждение, Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии, лаборатория биотехнологии-диагностический центр, п. Краснообск, Новосибирская область
 
Конкурсная работа: 

   В настоящее время в нашей стране развивается молочное животноводство, что сопровождается  высокой концентрацией животных на ограниченных территориях, изменениями  технологии их содержания и кормления. Это приводит к возникновению у них  вторичных иммунодефицитов и различных болезней, в том числе и инфекционных.

   В этиологии массовых бронхопневмоний значительная роль принадлежит вирусам, размножение которых в органах респираторного тракта способствует активизации условно-патогенной микрофлоры, в частности бактерий семейства Pasteurellaceae. Одним из них является вирус респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота. Вирус вызывает болезнь, характеризующуюся сильным кашлем, высокой температурой и поражением нижних отделов дыхательных путей животных. Возбудитель строго специфичен, поражает только органы респираторного тракта и очень чувствителен к воздействию факторов внешней среды, особенно к многократным замораживаниям и оттаиваниям, низким значениям рН. При +4ºС он сохраняет свою активность в течение  недели, при -70ºС - до 2- мес. В связи с низкой чувствительностью, а зачастую и невозможности проведения вирусологических исследований с использованием культур клеток, перспективным является использование молекулярных методов, особенно ПЦР (полимеразная цепная реакция).

 

Целью данной работы было изучение влияния сроков хранения в жидком азоте проб вируссодержащего материала на пригодность их исследования в ПЦР.

   В работе использовали фильтрующие насадки двух фирм (TPP  и еще одного производителя), культуральные матрасы трех фирм (TPP и еще 2-х производителей), культуральные планшеты трех фирм (TPP и еще 2-х производителей), криопробирки фирмы TPP и еще 2-х производителей.

   Пробы органов верхнего и нижнего респираторного тракта, поступившие из хозяйств, где регистрировались массовые респираторные болезни животных, перетирали в фарфоровых ступках с песком, гомогенизировали и готовили 10%-е суспензии на физиологическом растворе, после чего центрифугировали при 3000 об./мин. в течение 15 мин. Полученные суспензии предварительно исследовали в ОТ-ПЦР. В случае получения положительных результатов, вируссодержащую суспензию пропускали через фильтрующие насадки, затем вносили в перевиваемую культуру клеток ТЭБ (тестикулы эмбриона крупного рогатого скота). После пяти пассажей вируссодержащую суспензию титровали в 96-луночных плоскодонных планшетах, затем делили на несколько равных частей и помещали на хранение в жидкий азот. Через определенные промежутки времени их размораживали и исследовали в ПЦР.

 

   Изучение условий хранения вируса респираторно-синцитиальной инфекции в жидком азоте весьма актуально и имеет значение для дальнейших вирусологических исследований.

   Исследования показали, что хранившийся вируссодержащий материал  давал положительный результат в ПЦР в течение четырех и более месяцев при условии хранения в жидком азоте, в то время как при хранении в условиях бытового холодильника при температуре +4°С РНК вируса хранится две недели, при температуре -18°С – 2,5 - 3 месяца.

   Вирус респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота очень чувствителен (к заморозке и оттаиванию) температурным колебаниям, может сохранять свою активность в течение 3 мес. и быть пригодным для молекулярно-генетических исследований. Полученные данные необходимо учитывать при проведении диагностических исследований с использованием молекулярных методов.

 

   Для проведения данной работы использовали продукцию пяти фирм (одна из которых ТРР, Швейцария).

   Материал, из которого изготовлены изделия фирмы ТРР высокого качества, о чем свидетельствует факт благоприятного роста на нем культур клеток.

 

Рисунок 1.

   Культуральные флаконы (рис. 1) отличаются некоторым удобством - у них отсутствуют «мёртвые зоны» благодаря геометрии горловины, что позволяет полностью снимать культуру клеток с поверхности флакона серологической пипеткой. Легко и удобно закручивается крышка.

 

Рисунок 2.    

   Культуральные планшеты фирмы ТРР (рис. 2) хорошо маркированы просматриваемой, яркой буквенно-цифровой нумерацией. Имеется желтое поле для надписей, удобные, хорошо просматриваемые лунки.

 

Рисунок 3.

   В работе использовали криопробирки трех фирм объемом 1,2 мл (рис.3). Положительное отличие пробирок фирмы ТРР от двух других заключается в геометрии резьбы, которая располагается на внешней стороне пробирки, тем самым оставляя внутреннюю поверхность гладкой; пробирки плотно закрываются без силиконовых уплотнений; компактный размер пробирок позволяет вместить большее их количество в термоконтейнер. Основание, выполненное в форме звезды, придает пробирке наибольшую устойчивость.  

Это интересно!

Самка таракана способна за год отложить более двух миллионов яиц. Кроме того, таракан может девять дней жить без головы.

НАШИ ПРОЕКТЫ

 

КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ПОСУДА

ВИДЕО     ОБЗОР ТОВАРОВ     КАТАЛОГ

 


 

КРИОГЕННОЕ ОБОРУДОВАНИЕ

ВИДЕО     ОБЗОР ТОВАРОВ     КАТАЛОГ

ЗАПОЛНИТЬ КРИО АНКЕТУ

 


 

КОМПЛЕКСНЫЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

 

 

для центров ЭКО:   сайт   прайс

           для ЦГиЭ:   сайт   прайс

 


 

ОПТОВЫЕ ПОСТАВКИ РЕАКТИВОВ

Касторовое масло LUVOTIX R

1,4-Нафтохинон

Корзина

Итоговая сумма:   0.00 Руб.
В корзину
www.noykem.ru
lab@ noykem.ru
(499) 346-39-14, (495) 77-46-319
(383) 363-85-90 (многоканальный)


Copyright (с) 2013 - 2017 ООО "Нойкем"